度洛西汀中间体（S）-N,N-二甲基-3-羟-医学工程与组织工程研究-医学新闻-世界最新医学信息文摘

 

度洛西汀中间体（S）-N,N-二甲基-3-羟

基-3-（2-噻吩基）-丙胺的酶法合成

谢何青  夏平

(湖州师范学院生命科学学院兼湖州吉瑞生物技术有限公司，浙江湖州313000)

摘要：目的：采用酶法合成度洛西汀中间体（S）-N,N-二甲基-3-羟基-3-（2-噻吩基）-丙胺。方法：考察反应温度、pH值、反应时间及酶量对反应结果的影响，得到优化反应条件。结果：通过酶法合成了（S）-N,N-二甲基-3-羟基-3-（2-噻吩基）-丙胺。结论：最佳反应条件为：温度40℃, pH 7．0，反应时间24 h，用酶量60万单位时，产物的得率达76%。

酶法合成提高了(S）-N,N-二甲基-3-羟基-3-（2-噻吩基）-丙胺的收率和光学纯度。

关键词：（S）-N,N-二甲基-3-羟基-3-（2-噻吩基）-丙胺；酶法；合成

中图分类号：0657.32  文献标识码：A  文章编号：

度洛西汀(duloxetine)用于治疗抑郁症，是一种对羟色胺(5一HT)和去甲肾上腺素(NE)再摄取具有双重抑制作用的口服制剂(SNRI)，2004年8月获得美国FDA和欧盟委员会批准用于治疗抑郁障碍。度洛西汀选择抑制性强,胆碱能副作用小,其疗效明显强于治疗抑郁症的传统药物,因此具有较高的安全性和很好耐受性，成为治疗抑郁症的首先西汀类药物，预计2008年销售额将达22亿美元之多。[1] [2] [5]目前，该中间体一般是以化学试剂硼氢化钠和扁桃酸进行还原和手性拆分，[5]存在反应条件极为苛刻，对环境污染大，产物收率低等缺点，因而寻找其更为经济和绿色生产工艺已成为世界各大制药公司竞相开发的热点。本论文是药学、生物学和化学的综合性研究，以微生物所产生的具有还原作用的酶为手性合成催化剂催化前手性底物反应，可直接构建光学活性药物的手性中心，[4]一步合成度洛西汀关键手性中间体，从而缩短了duloxetine的合成工艺流程，提高收率和产物光学纯度，实现了化学酶法不对称合成手性药物的绿色化学工艺。

1  实验

1.1  实验原理

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作者介绍：谢何青，男，湖州师范学院兼湖州吉瑞生物技术有限公司，研究方向：制药工艺.

1.2 原料与仪器

2-噻吩-2-二甲胺基乙酮盐酸盐、异丙醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、甲醇、氢氧化钠均为化学纯；醇脱氢酶 (TbADH)：生化试剂，实验室保存；岛津LC-2010高效液相色谱仪（杭州库仑科技有限公司）。

1.3 实验步骤

固定化醇脱氢酶 (TbADH)：自制，以涤棉布为载体，吸附法制备。

反应pH的设定：将50mL 0.2mol／L不同pH值的磷酸盐缓冲液分别滴加到30g 载体上。室温风干后固定化醇脱氢酶液 。

基本反应体系为100mL带塞磨口锥形瓶中，加入2-噻吩-2-二甲胺基乙酮盐酸盐（25.3g，0.2mol），45mL异丙醇，5ml乙醇，30g固定化醇脱氢酶 (60万u)，于摇床中40℃震荡反应24h。反应液经薄层色谱分析（氯仿：甲醇=8：1），离心去除醇脱氢酶，取上清液减压蒸馏，残留物溶于乙酸乙酯，碱、盐洗，无水Na2SO4干燥，甲醇一丙酮结晶得目标化合物27g，产率76%，[α]30D= -7.6°(C=1，MeOH)。（文献[3][α]22D =-7.6°(C=1,MeOH)）。

2  实验结果与讨论

2．1  反应温度对实验结果的影响

   酶是一种反应条件比较温和的催化剂，反应温度会对酶的活性有着很大的影响，本反应中最适酶促反应温度为40℃，温度过低时酶的催化速率太慢，温度过高会使酶失活，从而影响产物的收率。

2．2  反应pH对实验结果的影响

   反应时间也是公司关注的焦点，尽量缩短生产周期，从而节省生产成本和扩大生产，酶促反应的速率一般较快，本反应中最佳反应时间是24h。

下略